作者：高建伟 鲁承 崔正云 崔成都 贾文影 李刚不同基因组dna模板微卫星pcr扩增
摘要：文章主要探讨使用黑熊毛发作为试验材料替代其他生物样品进行遗传多样性研究的可行性,筛选满足试验需求的最佳使用量。以延边白头山制药有限公司养熊场的4头成年东北黑熊为试验材料,分别5次拾取2头黑熊铁笼内散落的带有毛囊的50、100根毛发,对麻醉的2头黑熊抽取全血3 mL以及皮下结缔组织1 g,并分别采用不同方法提取基因组DNA。以微卫星位点ABB12和UT35为引物,设置20、50、100 ng·μL-13种模板浓度进行PCR扩增。结果显示,采用50 ng·μL-1的模板浓度均可获得较好的PCR产物,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对扩增基因具有较好的分辨效果。毛发DNA、血液DNA和组织DNA的PCR产物数量和质量并无明显差异。毛发数量与所提取的DNA浓度有一定关系。利用15个毛发DNA的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,均可观察到清晰的条带。研究结果进一步证明毛发DNA可作为东北黑熊遗传多样性研究的试验材料。
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