作者：胡薇 李沐 李婷 田玉华 孟星宇 刘宁梅花鹿鹿茸端粒酶端粒酶逆转录酶荧光定量差异表达
摘要：为了检测梅花鹿鹿茸顶端组织不同部位的端粒酶活性及端粒酶逆转录酶（TERT）基因的mRNA表达水平，分离鹿茸顶端组织的茸皮层、间充质层及软骨层，并进行细胞培养，利用TRAP银染法测定不同部位的端粒酶活性。再利用TRIzol试剂法分别提取茸皮层、间充质和软骨细胞的总RNA，逆转录合成cDNA。根据Gen．Bank已发表的相关序列设计梅花鹿TERT基因部分序列特异引物并克隆TERT基因。采用相对荧光定量Real—timePCR法检测TERT在鹿茸顶端不同部位细胞的表达丰度。结果表明：在鹿茸顶端组织茸皮层、间充质层和软骨层均检测到了端粒酶活性．其中间充质层的端粒酶活性最高，软骨层次之。茸皮层端粒酶活性最低：而体外培养的不同代数间充质细胞的端粒酶活性无明显差异。成功获得了鹿茸组织TERT基因部分编码区cDNA序列．该基因长915bp。编码305个AA；与牛、羊TERT基因进行同源性分析显示。核苷酸序列分别为94．89％和94．31％：氨基酸序列分别为92．16％和92．11％。相对荧光定量PCR差异分析发现．TERT基因在鹿茸顶端不同部位组织均有表达。其中．在间充质组织的表达水平高于软骨和茸皮层组织。
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