作者：郝丽 李和平 严厉东北梅花鹿鹿茸全长cdna文库smart技术
摘要：为克隆出与鹿茸生长发育相关基因的全长序列，采用SMART技术构建了东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库。用SVTotalRNAIsolationSystem试剂盒提取总RNA，以逆转录酶PowerScriptTM反转录合成第一链cDNA，然后通过LD—PCR合成并扩增dscDNA。扩增产物经纯化、SfiI酶切、过CHROMASPIN-400柱去除小片段后，连接到s6I消化过的pDNR—LIB质粒载体中，最后用电转化法将重组质粒转化到EcoliDH5d内得到原始文库。经测定，构建的原始文库约含有2．56×10^6个重组子，插入片段多在0．5～2kb之间，平均插入片段长度约1．1kb，重组效率接近100％。结果表明，东北梅花鹿鹿茸尖端组织的全长cDNA文库已构建成功。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
