作者：孙美涛; 梅雯; 杨泽芳; 丁小倩; 张若鹏; ...人线粒体转录终止因子3真核表达载体鉴定
摘要：目的：构建和鉴定带3×Flag标签的人线粒体转录终止因子3基因（hMTERF3）真核表达载体。方法：根据NCBI数据库中hMTERF3基因序列设计引物，采用聚合酶链式反应从pGEM-hMTERF3重组克隆载体中扩增出hMTERF3基因开放阅读框序列，经HindⅢ和BamHⅠ双酶切后，连接入真核表达载体p3×FLAG-CMV-14的多克隆位点中，构建重组质粒p3×FLAGCMV-hMTERF3，分别用菌落PCR、限制性核酸内切酶分析和DNA序列分析3种方法鉴定重组子。结果：重组质粒p3×FLAGCMV-hMTERF3经双酶切鉴定和菌落PCR鉴定均获得大小为1254bp的目的条带，DNA序列分析和Blast序列比对结果表明该序列与GenBank中hMTERF3基因序列的同源性达到100%，插入基因的大小和方向均正确。结论：成功构建了hMTERF3基因的真核表达载体，为进一步研究hMTERF3基因在恶性肿瘤发生发展中的作用奠定了基础。
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