作者：熊伟; 陈贵元; 何敏; 左绍远细胞周期蛋白载体构建真核表达
摘要：目的：为研究细胞周期蛋白在肿瘤形成过程的分子机制，构建带FLAG标签的细胞周期蛋白E的真核表达载体，并检测其在瞬时转染HeLa细胞株中的蛋白表达。方法：通过RT—PCR扩增cyclinE基因编码cDNA，并将扩增的。DN段插入p3XFLAG—CMV^TM-14真核表达载体，重组子经酶切分析和测序鉴定后，用脂质体介导的基因瞬时转染法，将重组正确的表达载体转染HeLa细胞，用Western—blot技术检测其在HeLa细胞中融合蛋白的表达。结果：经酶切鉴定和测序分析证实人。vclin E的真核表达载体构建成功，并能在瞬时转染的HeLa细胞中表达。结论：成功构建了人cyclinE的真核表达载体，为进一步研究细胞周期蛋白的功能奠定了基础。
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