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柱花草炭疽菌致病力丧失突变菌株1869的T-DNA插入位点侧翼序列的克隆

作者:许沛冬; 郑肖兰; 赵艳; 李秋洁; 吴伟怀; ...柱花草炭疽菌致病力基因克隆

摘要:通过对实验室已构建的柱花草炭疽菌TDNA突变体库中各转化子致病力的测定,获得致病力丧失突变菌株1869。对其进行PCR检测以验证TDNA在1869基因组中插入情况,并测定观察其菌落直径、菌落形态及产孢量等生物学特性,利用TAILPCR克隆标记基因侧翼序列,采用生物信息学方法比对基因信息。结果表明,与柱花草炭疽菌野生型菌株CH008相比,突变菌株1869表现致病力丧失,菌落生长速率也显著低于野生型;然而,在分生孢子形态、产孢能力、孢子萌发率等方面与野生型并无明显差异。TAILPCR扩增得到TDNA插入位点RB端序列467bp,LB端侧翼序列388bp,经两侧序列拼接比对,昕得序列与Pacl同源性达到92%~96%,推测可能由于基因表达产物调节菌株对pH值的敏感性。从而影响了其致病过程。

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草业学报

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