作者：霍松; 陈慧; 朱琼华; 解新明象草gateway技术4cl基因rnai载体构建
摘要：象草是热带和亚热带地区广泛栽培的多年生资源植物。为探讨华南象草4-香豆酸：CoA连接酶（4CL）基因下调表达对木质素合成的影响,本研究设计1对特异引物,PCR扩增获得一段长为374bp的干扰片段。通过TO-PO克隆,将该片段克隆到载体pCR/GW/TOPO,构建了入门克隆载体pENTR-4CL;再经过LR反应使pE-NTR-4CL上的干扰片段进入目的载体pCB2004B上,形成表达载体pCB2004B-4CL,最后通过冻融法将其转入到根癌农杆菌EHA105中。菌液PCR结果表明RNAi质粒已成功转入农杆菌,为进一步利用RNAi技术研究4CL基因的功能奠定了基础。
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