作者:王志勇; 袁学军; 刘建秀; 郭海林狗牙根srap标记正交试验体系优化引物
摘要:利用正交设计,从Mg^2+、dNTP、引物浓度和DNA聚合酶4种因素3个水平以及不同的模板DNA浓度来优化狗牙根SRAP-PCR反应体系,并对引物进行了全面筛选。狗牙根SRAP—PCR优化反应体系结果为:2μL 10×buffer、40ng模板DNA、Mg^2+ 1.25mmol/L、dNTP260μmol/L、引物0.2μmol/L、TaqDNA聚合酶1.0U,总体积20μL。运用该结果从90对引物中共筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SRAP引物34对。优化体系的建立及其引物的筛选为今后利用SRAP标记技术进行狗牙根遗传分析、图谱构建、基因定位与种质资源鉴定奠定了技术基础。
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