作者：张金文; 熊春蓉; 李静雯; 王旺田; 孟亚雄...腈水解酶基因酶活性温度乳糖
摘要：通过PCR技术从克雷伯氏臭鼻杆菌基因组DNA中克隆到编码腈水解酶的基因（bxn），插入pET28a（＋）载体的NcoⅠ和SacⅠ之间，构建了bxn基因的原核生物表达载体pET—BX。通过SDS-PAGE鉴定出重组克隆，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达出了一种37．7kD的特异蛋白，其表达量占宿主菌总蛋白的18．2％。在添加终浓度为4mmol／L的乳糖和28℃培养条件下，重组克隆菌可表达较高产量的特异酶蛋白，可将澳苯腈降解为无毒物质，并具有较高活性。
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