作者：马晖玲; 卢欣石; 曹致中; 余密密紫花苜蓿基因转化农杆菌介导法
摘要：通过农杆菌介导法对紫花苜蓿不同品种植株进行了抗旱基因转化的研究．得到了一套紫花苜蓿基因转化的优化体系。研究表明．100mg／L的卡那霉素对苜蓿愈伤组织的生长有着显著的抑制效应。250mg／L头孢霉素能够有效地抑制农杆菌菌株LBA4404的生长。紫花苜蓿供试材料被切后直接用OD600值为0．3～0．5的农杆菌LBA4404菌液侵染10～15min；培养材料共培养3d后在愈伤组织诱导培养基MS＋2mg／L2．4-D＋0．5mg／LKT＋30g／L蔗糖＋9g／L琼脂＋250mg／L Cef上诱导出愈伤组织；在体细胞胚分化培养基MS＋1．0mg／LBA＋0．3mg／LNAA＋30g／L蔗糖＋9g／L琼脂＋50mg／LKan＋250mg／LCef上促进体细胞胚的分化；分化出的体细胞胚在再生培养基上（同分化培养基．Kan为80mg／L）进一步发育成抗性转化苗；转化的无根小苗在生根培养基1／2MS＋1．0mg／LIBA＋1％蔗糖＋0．8％琼脂＋100mg／L卡那霉素上可生长出根系。
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