作者：赵柯 王临旭 庄严 黄德东 李媛 康文臻 孙...启动区遗传荧光素类基因病毒反转录
摘要：目的构建含人载脂蛋白BmRNA编辑酶催化多肽样蛋白3F（apolipoprotein B mRNA editing enzyme，catalytic polypeptide—like 3F，APOBEC3F）基因启动子的萤光素酶报告基因载体。方法应用5’cDNA末端快速扩增分析（5’rapidam—plification of cDNA ends．5’RACE）技术确定APOBEC3F转录起始位点，利用PCR技术扩增人APOBEC3F启动子序列，构建含人APOBEC3F启动子的萤光素酶报告基因载体，行双酶切及测序鉴定，并通过双萤光素酶报告基因系统检测启动子活性。结果APOBEC3F基因转录起始位点位于GenBank已公布的APOBEC3FcDNA起始位置上游13个核苷酸处，测序结果表明克隆获得的APOBEC3F基因启动子序列与GenBank报道一致。重组载体DGL3-A3F—Prom组F／R值（0．342082±0．023516）与空载体pGL3-basic组（0．007871±0．002357）相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论成功构建了含人APOBEC3F基因启动子的萤光素酶报告基因载体，为更深入研究APOBEC3F基因转录调控机制奠定了基础。
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