BcMF3反义基因植物表达载体的构建及其对拟南芥的遗传转化

作者：刘乐承; 余小林; 叶纨芝; 向珣; 卢钢; 曹...反义基因bcmf3白菜表达载体遗传转化

摘要：根据编码白菜（Brassica rapa L．ssp．chinensis，syn B．campestris ssp．chinensis）果胶甲酯酶的BcMF3基因cDNA序列内部第1343～1797个碱基之间序列设计引物，从白菜花蕾eDNA中PCR扩增出455bp的片段，把该片段作为反义基因连接至双元载体pBI121上，得到了植物表达栽体pBI-B3，并用“三亲杂交”法导入农杆菌LBA4404菌株中，PCR扩增和酶切结果表明所构建的植物表达载体pBFB3含有BcMF3反义基因片断，并已导入了根癌农杆菌（Agrobacterinrn tume fuciens）中；采用花序浸润法转化拟南芥（Arabidopsis thaliana）后，播种筛选浸润植株的种子获得了5株卡那霉素抗性植株，PCR扩增证明BcMF3反义片段成功整合到拟南芥基因组中；转基因拟南芥子代（T2）的抗性分离符合孟德尔分离比例，表明外源基因是单一位点插入。

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