作者：李燕 宋填 冷平 熊辉 何洋抑制消减杂交dna文库肺炎链球菌多耐药
摘要：目的筛选肺炎链球菌多耐药相关DN段,探索肺炎链球菌多耐药的分子机制。方法提取多耐药菌株09062407与标准菌株ATCC49619基因组DNA,应用抑制性消减杂交技术得到富含差异DN段的消减混合物,与pEASY-T3克隆载体连接并转化到TP10感受态细胞中,构建多耐药肺炎链球菌差异DNA消减文库。结果耐药株与敏感株间差异片段大量富集,得到大小200～1 500 bp弥散状DNA条带;将这些差异DN段富集后构建成消减文库,随机挑取192个白色克隆,经PCR扩增,155个克隆插入有200～800 bp大小片段。结论抑制消减杂交技术能有效筛选肺炎链球菌多耐药株与敏感株间差异DN段,可进一步通过克隆鉴定等生物信息学方法寻找与肺炎链球菌多耐药相关基因。
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