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分群分析法获得与多花黑麦草抗叶班病基因连锁的EST—CAPS标记

作者:丁成龙; 沈益新; 顾共如; 三浦優一多花黑麦草叶班病分子标记

摘要:利用多花黑麦草叶斑病抗性和敏感个体杂交构建F1分离群体,采用分群分析法(bulked segregant analysis,BSA),通过多花黑麦草表达序列标签(expressed sequence tag,EST)的PCR扩增和扩增产物的限制性内切酶酶切多态性(cleaved amplified polymorphic sequence,CAPS)筛选,获得一个同多花黑麦草草抗叶斑病紧密连锁的EST—CAPS标记p56。对照多花黑麦草细胞质雄性不育(CMS)群体构建的遗传连锁图,该ESTCAPS标记位于多花黑麦草的第5遗传连锁群(LG5)。对cDNA文库中对应于标记位点p56的EST序列片段分析和基因库搜索结果表明。该EST所编码的氨基酸序列同大麦天冬酰胺合成酶基因HvAS1和HvAS2的部分氨基酸序列片段同源性很高,推测位点p56所处的基因为编码多花黑麦草天冬酰胺合成酶基因。该分子标记可用于多花黑麦草分子标记辅助育种。

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草地学报

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