作者:刘吉平; 曹阳; Smith; J; E; 徐兴耀家蚕微粒子病pcr诊断模拟感染微孢子浓度
摘要:在比较研究不同浓度家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,N.b)孢子与模拟染毒N.b孢子蚕卵、蚕蛾的模板DNA制备方法的基础上,选用MP1/MP2和V1F/530R两对引物进行PCR扩增检测.结果为:碱性条件预处理N.b孢子后再抽提的DNA,其得率略高于常规方法抽提的DNA,但两者的模板质量相同;MP1/MP2和V1F/530R两对引物均可有效地检出N.b孢子DNA,前者的检测灵敏度为1μL3×106mL-1以上浓度的N.b孢子DNA,后者为1μL3×105mL-1以上浓度;对不同浓度N.b孢子DNA与蚕蛾DNA混合后进行PCR检测,V1F/530R引物的检测灵敏度为1μL3×106mL-1N.b孢子DNA.
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