作者：孟倩; 雷婷; 张曼核仁磷蛋白1质粒构建
摘要：目的构建pc DNA3.1（＋）-NPM1真核表达质粒,体外转染人膀胱移行细胞癌pumc-91细胞并观察其表达情况。方法设计引物,采用PCR扩增核仁磷蛋白1（Nucleophosmin,npm1）基因编码序列;运用基因重组方法对其进行双酶切,插入pc DNA3.1（＋）载体,经菌液PCR、测序对重组质粒进行鉴定。将成功构建的质粒经脂质体介导转染至pumc-91细胞,Western blot验证蛋白表达情况。结果经菌液PCR、测序鉴定表明成功构建pc DNA3.1（＋）-NPM1质粒,将成功构建的质粒转染至pumc-91细胞,Western blot证实转染pc DNA3.1（＋）-NPM1表达质粒的pumc-91细胞npm1蛋白过表达。结论成功构建pc DNA3.1（＋）-NPM1重组质粒,为进一步研究NPM1蛋白的功能奠定基础。
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