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HRCA技术联合DNA芯片检测结核分枝杆菌利福平耐药基因突变的初步分析

作者:周琴; 杨静; 范凌; 王丹超分支滚环扩增dna芯片基因突变结核分枝杆菌耐药

摘要:目的对超分支滚环扩增技术(hyperbranched rolling cycle amplification,HRCA)技术联合DNA芯片检测结核分枝杆菌利福平耐药基因突变进行初步分析。方法采用直接涂片检测在2013年至2015年期间搜集的898份痰液样本中结核分枝杆菌情况,同时采用改良罗氏培养法与HRCA技术联合DNA芯片法对阳性样本进行鉴定,并对利福平耐药基因进行初步分析。结果 989份检测的痰液样本中361份为阳性,涂阳率为40.2%。HRCA技术联合DNA芯片法阳性率为98.0%,显著高于改良罗氏培养法(35.2%),且差异具有统计学意义(P〈0.05)。通过HRCA技术联合DNA芯片法发现85株结核分枝杆菌对利福平耐药,其中单纯rpoB基因突变比例为36.5%(31/344);katG基因与rpoB基因均突变比例为60.0%(51/344);inhA基因与rpoB基因突变比例均为3.5%(3/344);且二位点联合突变及单位点突变率分别为89.4%(76/85)与10.6%(9/85)。结论 HRCA技术联合DNA芯片法能够有效快速检出结核分枝杆菌突变基因,rpoB基因突变为主要结核分枝杆菌利福平耐药的基础,且突变呈现多样性。

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标记免疫分析与临床

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