作者：张凤秋; 李曙霞; 杨连甲; 吴织芬牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶k融合蛋白多克隆抗体
摘要：目的纯化牙龈卟啉单胞菌牙龈蛋白酶K催化结构域（KGPcd）融合蛋白并制备其多克隆抗体，为下一步的实验提供条件。方法KGPcd蛋白与载体pET-16b中的His标签融合表达，用Ni—NTA亲和层析纯化融合蛋白，复性后用Westernblot检测。以重组、纯化的KGPcd蛋白为抗原，免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体，用间接ELASA法检测抗体效价，WesternBlot进行抗血清特异性试验。结果经亲和层析、复性得到纯化融合蛋白His．KGPcd，Westernblot进一步证实纯化的蛋白为His．KGPcd融合蛋白。抗血清稀释达1：3200时，ELASA法仍有明显的抗原抗体反应，Westernblot也进一步证实抗血清能够与KGPcd发生特异性反应，抗体仅特异识别目的蛋白。结论成功制备兔抗KGPcd多克隆抗体，为后续研究奠定基础。
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