作者：赵庆芳 韩静 马平霞 丁文龙 李巧峡西伯利亚百合rna提取
摘要：在对感染西伯利亚百合的CMV、LSV、LmoV3种病毒的检测上，对4种常见的RNA提取方法及影响RT-PCR体系的因素进行了比较研究。改良优化了的RNA提取方法，不需用DEPC水处理和高温烘器皿，省去液氮研磨过程，采用该法从百合叶片中提取总RNA，整个过程及后继反应均不需使用RNasin，降低了成本，同时提取的RNA质量高，适于后期Rrr-PCR的检测，更适合于百合幼嫩叶片和试管苗RNA的提取。运用一步法，建立了CMV、LSV、LMoV3种病毒的RT-PCR优化体系，最优反应体系为：M—MLV5×Reaction Buffer 1μL、10×PCR buffer 0．5μL、2．5mM dTPs（each）0．8μL、10pmol／μL下游引物0．2μL、10pmol／μL上游引物0．2μL、M-MLVRT 200U／μL 0．1μL、2．5U／μL Taq polymerase0．1μL；0．4μL感病材料RNA提取液，剩余部分用无菌双蒸水补足，使反应体系达到10μL。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
