作者:张雪寒; 何孔旺; 卢维彩; 俞正玉; 茅爱华...ehec转位紧密素受体志贺毒素融合基因
摘要:为了更好防治由出血性大肠杆菌O157:H7引起的疾病,尝试研制基因工程疫苗.其中亚单位疫苗具有很大优势。方法:构建表达tir和stxb的融合基因。将tir基因中间295个氨基酸残基(Tir295)与stxB亚基基因72个氨基酸串联。构建pET28a—stx2b—Tir295-stx1b重组质粒,将其转化于BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,经SDS--PAGE电沫检测,该融合蛋白获得了高效表达。结果:薄层扫描分析表明,目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的30%左右。结论:由于该融合蛋白由Tir、stx1b和stx2b三部分抗原组成.可刺激机体产生针时转位紧密素受体(Tir)和志贺毒素(stx)的抗体,在EHEC0157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。
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