人肠道病毒D68型微复制子的建立

作者：潘明磊; 高帅; 成金燕; 徐亚楠; 李显煌; ...反向遗传学微复制子报告基因

摘要：建立人肠道病毒D68型（EV-D68）微复制子体系。利用增强绿色荧光蛋白（EGFP）或萤火虫荧光素酶（FLuc）报告基因替换病毒编码区,通过酶切连接,构建EV-D68 T7和PolⅠ系统微复制子体系,获得重组质粒pT7-miniEGFP、pT7-miniFLuc、pHH21-miniEGFP、pHH21-miniFLuc和pHH21-miniFLucΔpolyC。微复制子转染RD细胞,48h后荧光显微镜观察EGFP表达情况或用双报告系统检测荧光素酶表达水平。T7和PolⅠ系统微复制子均可表达报告基因,但PolⅠ系统荧光素酶表达水平是T7系统的5倍。并且病毒非编码区的PolyC区域对于病毒蛋白的表达起着重要的作用。本研究成功构建了EV-D68微复制子体系,为EV-D68非编码区功能研究提供工具。

注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社