作者：徐海 王义伟 唐应华 郑其升 侯继波禽流感病毒m2et7噬菌体噬菌体疫苗
摘要：构建展示A型禽流感病毒M2e多肽的重组T7噬菌体，检测其对SPF鸡的免疫保护效果。比对GenBank近期发表的A型禽流感病毒M2e基因序列进行人工合成并重复至两拷贝，将其克隆到T7Select415-1b噬菌体多克隆位点，构建重组噬菌体T7-M2e。经PCR鉴定并序列测定筛选阳性重组噬菌体，SDS-PAGE和Westernblot检测重组噬菌体表面M2e多肽。重组噬菌体以1×10^10pfu／只剂量免疫SPF鸡，免疫后不同时间段采血通过ELSIA检测血清中抗M2e抗体，免疫荧光检测血清抗体与H9亚型禽流感病毒的结合能力，并以200个EIDn／P．剂量进行攻毒保护效率检测。成功构建重组噬菌体T7-M2e，插入两拷贝M2e基因获得表面展示，并与M2e抗体有免疫反应活性。噬菌体疫苗免疫后均产生抗M2e抗体，其抗血清能跟病毒粒子特异性结合，攻毒保护率达4／5（80％）。获得了展示禽流感病毒M2e多肽的重组噬菌体，噬菌体疫苗免疫鸡产生较高血清抗体并提供攻毒保护，为新型通用禽流感疫苗研制提供新思路。
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