作者：董慧瑾 钱渊 张又 邓莉 赵林清 朱汝南 陈...a组轮状病毒vp4基因pb基因亚型g9基因型打点杂交
摘要：P[-8]b基因亚型是国内外新近发现的A组人轮状病毒（HRV）VP4基因的一种新亚型，本研究旨在建立有效鉴别HRVP[8]a和P[8]b基因亚型及P[4]和P[6]基因型的VP4基因打点杂交分型方法，并运用此方法对2009-2010年首都儿科研究所附属儿童医院门诊及住院腹泻患儿中P[8]b基因亚型HRV的流行情况及其G／P基因组合情况进行研究。通过对GenBank序列数据库可检索到的国内外HRV各种P基因型及亚型的VP4基因序列应用相关软件进行基因分析，在不同基因型别间核苷酸变异密集而相同P基因型内核苷酸高度保守的的位置设计各型别探针，并分别以本实验室上传GenBank的北京HRV地方株PF4]和P[6]基因型及P[8]a和P[8]b亚型的VP4基因作为相应型别探针的合成引物的设计模板及探针经PCR合成的合成模板，合成地高辛素标记的DNA探针。经测序验证所建立的VP4基因杂交分型方法结果可靠。对门诊88例（55％，88／160）及住院79例（70．5％，79／112）HRV腹泻患儿的P分型结果显示P[8]a亚型仍为主要型别，前者为96．6％（85／88），而后者为62．0％（49／79）；P[8]b亚型在住院HRV感染腹泻患儿中占较高比例（27．9％，22／79），虽然其在门诊HRV感染患儿中也存在，但仅占2．3％（2／88）；另外单纯P[4]基因型HRV感染仅在住院腹泻患儿中检测到1例（1．3％，1／79），而P[6]基因型在门诊及住院HRV感染腹泻患儿中均未检测到；本组标本中HRVPF8]b亚型主要与G9基因型组合。本研究表明G9P[8]b型HRV在北京腹泻儿童中有流行。
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