作者：吕洋; 杨珮珮; 叶龙; 赵平; 姜经航肝细胞癌sp细胞流式细胞仪
摘要：目的采用流式细胞仪优化Hoechst33342染料浓度,检测肝细胞癌（HCC）MHCC-97H细胞中侧群（SP）细胞与非侧群（NSP）细胞中微小RNA-21（miRNA-21）的表达情况。方法常规制备MHCC-97H单细胞悬液,采用不同浓度（5、6、7、8、9、10、11、12 mg/L）的荧光染料Hoechst33342染色,以维拉帕米拮抗组为对照,优化最适合的Hoechst33342染料浓度,通过流式细胞仪分离SP、NSP细胞;采用RT-PCR法检测SP、NSP细胞中miRNA-21的表达情况。结果优化Hoechst33342浓度为10 mg/L,活细胞比例较高,是最适染色的浓度,此时MHCC-97H中SP细胞比例为（8.4±0.7）%;从SP、NSP细胞中提取的总RNA纯度为1.8-2.0,其中没有DNA和蛋白质混杂;SP细胞的miRNA-21表达水平是NSP细胞的（7.30±0.78）倍,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论优化的Hoechst33342浓度可以提高SP细胞的纯度,同时miRNA-21表达可能与HCC干细胞分化有关。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
