作者：钱海鹏; 向阳; 田芳; 李雷多药耐药基因mrna体外转录
摘要：目的应用体外转录法大量制备人野生型多药耐药基因MDR1的mRNA,转染人造血干细胞后检测P糖蛋白表达.方法含人野生型MDR1基因的cDNA经酶切连接后构建可体外转录的模板,经体外转录得到mRNA,转染人造血干细胞,通过RT-PCR法检测mRNA及Western-bloting法检测P糖蛋白表达.结果转染后细胞mRNA相对含量(1.380)明显高于对照组(1.105)(P＜0.01);Western-bloting可见转染组MDR1基因编码的P-gp蛋白条带明显强于对照组.结论经体外转录法可大量制备人野生型MDR1基因的mRNA,并可成功应用于转染人造血干细胞,产生P糖蛋白表达.
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