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碱性成纤维细胞因子对SD大鼠表皮干细胞分化为神经干细胞的影响

作者:许正伟; 贺宝荣; 刘团江; 郭华; 郝定均碱性成纤维细胞因子表皮干细胞神经细胞分化

摘要:目的研究碱性成纤维细胞因子(bFGF)对大鼠表皮干细胞分化为神经细胞的影响。方法分离获得饲养了1~3天的新生SD大鼠表皮基底层组织,利用10^min快速贴壁法消化、分离获得表皮干细胞,于倒置显微镜下观察表皮干细胞的形态。培养表皮干细胞的培养基为K-SFM,然后按照不同密度表皮干细胞进行分组处理(0.1×10^7/mL,0.3×10^7/mL,0.5×10^7/mL,0.1×10^6/mL),每组加入20ng/mL的bFGF,利用细胞免疫组织化学法检测细胞标志物Nestin和NSE的变化,以及观察细胞形态发生的变化。结果成功分离得到SD大鼠表皮干细胞;bFGF诱导后,0.3×10^7/mL组和0.1×10^7/mL组细胞第3天即可见细胞开始伸展生长,在约1周时细胞开始分化成神经细胞;且在细胞形态发生双极化改变的数目趋势上也具有一致性;Nestin和NSE检测均呈阳性表达。结论bFGF有助于诱导表皮干细胞向神经细胞的分化,而且该诱导作用具有一定的细胞密度依赖性。

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