作者：张宇; 蒙轩; 王勋hk2肝细胞癌shrna沉默
摘要：目的探究己糖激酶2(HK2)在肝癌组织中的差异表达及其对肝癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法收集48例肝癌组织及对应的癌旁组织,免疫组化检测HK2表达量;Western blot法检测人肝癌细胞Hep G2及正常肝细胞L-02中HK2表达量。统计并分析HK2表达与肝癌临床病理特征关系。构建4个HK2小发卡RNA(shRNA)载体,Western blot法检测干扰效率,选择沉默最优的建立稳定转染的细胞株。针对空白组(正常培养、未转染质粒)、control shRNA组(转染control shRNA)、HK2 shRNA组(转染shRNA3) Hep G2细胞,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡。结果 HK2在肝癌组织中表达显著升高,其表达与肿瘤直径、TNM分期、组织病理分级存在相关性。HK2表达的降低可显著降低Hep G2细胞增殖活性,使得细胞周期发生明显转变,更少停滞在S期;显著升高Hep G2细胞凋亡率。结论HK2表现出了较强的抗肿瘤潜能,具有一定的临床意义,为将来基于HK2进行肝癌临床诊断、预后判断及分子靶向治疗提供新的思路和理论依据。
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