作者：王健; 潘亚萍; 徐元宏; 沈继录; 王中新肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶外排泵耐药
摘要：目的研究碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌（CRKP）抗生素敏感性和耐药基因分析,以及通过表型检测分析外排泵抑制剂对CRKP的亚胺培南、美罗培南和替加环素耐药性影响。方法收集并筛选医院临床分离非重复的CRKP,采用纸片扩散法和Vitek2法测定临床常见抗菌药物的敏感性;采用Carba-NP试验和改良Hodge试验对碳青霉烯酶进行筛选,并同对碳青霉烯酶耐药基因、ESBL和Amp C酶基因进行PCR扩增和序列分析;采用琼脂稀释法检测筛选菌株外排泵的表型;ERIC-PCR进行同源性分析。结果共筛选出31株CRKP,Carba-NP试验和改良Hodge试验显示有1株细菌不产碳青霉烯酶;KPC酶基因的PCR检测结果显示有27株KPC酶检测阳性,与碳青霉烯酶表型检测基本一致,部分菌株同时还产生了ESBL和Amp C酶;外排泵的抑制试验结果显示有3株对亚胺培南和美罗培南的最低抑菌浓度（MIC）分别下降4倍和8倍,而替加环素却未下降;ERIC-PCR分型显示有9种类型,其中1型13株,为主要流行株。结论 CRKP存在耐药基因积聚共存现象,导致CRKP对大多数临床常用抗菌药物呈高度耐药;CRKP产碳青霉烯酶以KPC-2型酶为主,是CRKP对碳青霉烯类耐药的主要机制;外排泵系统可能参与CRKP对碳青霉烯类耐药。
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