作者：孙世林; 周咏; 张雷; 李岩; 张凯; 何家才...bmmscs血管内皮生长因子基因转染
摘要：目的通过体内与体外的手段验证miR-210能够有效的促进骨髓间充质干细胞（BMMSCs）血管内皮生长因子（VEGF）的表达和分泌。方法构建慢病毒载体，分别转染BMMSCs和人脐静脉内皮细胞（HUVEC），Lenti-miR-210／BMMScs和Lenti-LacZ／BMMSCs培养第7天RT-PCR法检测VEGF表达，第14天Westernblot法检测VEGF表达，PKH26荧光染色Lenfi-miR-210／HUVEC和Lenti-LacZ／HUVEC，Ma-trigel成管实验24h，荧光显微镜观察成管效果；agomir-210和agomir-Nc分别与BMMSCs复合HyStem-HP凝胶缓释系统裸鼠皮下注射7d后取标本CD31免疫荧光染色。结果miR-210慢病毒载体转染BMMSCs，第7天RT．PCR和第14天Westernblot法检测VEGF表达，明显高于Lenti-LacZ／BMMSCs（P〈0．05）；Matrigel成管实验24h结果显示：Lenti-miR-10／HUVEC组与Lenti-LacZ／HUVEC组相比，端端接触明显且管状结构完整；agomir-210和agomir-NC与BMMSCs复合HyStem．HP凝胶缓释系统裸鼠皮下注射7d后标本CD31免疫荧光染色结果：agomir-210组CD31阳性细胞含量明显高于agomir-NC组。结论通过体内与体外的检测，miR-210过表达能够有效促进BMMSCs血管内皮生长因子的表达和分泌。
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