作者:汪渊; 左艳; 左莉; 刘虎; 张素梅; 熊江霞...印迹试验southem杂交dna片段琼脂糖凝胶电泳固相支持物基因组dna硝酸纤维素膜dna印迹限制内切酶靶dna电泳分离扩增片段分子大小pcr尼龙膜转移
摘要:DNA印迹是一种将电泳分离的DN段转移到固相支持物上用探针与靶DNA进行杂交的技术,又称Southern杂交.利用一种或多种限制内切酶酶切消化的基因组DNA[1],或经PCR获得扩增片段,经琼脂糖凝胶电泳,所得的DN段按分子大小分离,DN段经琼脂糖凝胶、变性,并将凝胶中的单链DN段转移到固相支持物上(多为硝酸纤维素膜,NC或尼龙膜),用放射性核素标记或非放射性核素(如地高辛)标记的探针与交联于NC膜上的DNA杂交,杂交斑点对X线底片曝光产生放射自显影图像或显色,有互补序列的DNA可通过形成特异的探针-靶序列复合物使靶序列可见.
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