作者：兰阿峰; 杨曼; 郭素芬; 邓百万野生秦岭羚牛瘤胃产甲烷古菌分子多样性
摘要：［目的］了解野生秦岭羚牛瘤胃产甲烷古菌的组成及其多样性。［方法］提取野生秦岭羚牛瘤胃内容物总DNA，选用产甲烷菌特异性引物Met86F和Met1340R，对总DNA进行16S rRNA特异性扩增，构建秦岭羚牛瘤胃产甲烷古菌16S rRNA克隆文库，对阳性克隆进行PCR-RFLP（限制性内切酶片段长度多态性）分析，并对HaeⅢ酶切带谱不同的菌液进行测序，构建系统发育树。［结果］根据酶切带谱分析和测序结果的不同，将随机挑取的105个阳性克隆归为14个不同的可操作分类单元(OTUs)。系统发育分析表明，这些克隆序列均位于广域古菌门(Euryarchaeota)，隶属甲烷杆菌科(Methanobacteriaceae，65.71%)、Methanomassiliicoccus(29.52%)和Methanosarcinaceae(4.76%)3个科。其中有57个序列与可培养菌相似度在97%以上，分属于Methanobrevibacter millerae、Methanobrevibacter olleyae和Methanobrevibacter thaueri。其余48个序列与未培养菌相似度较高，占11个OTUs。［结论］野生秦岭羚牛瘤胃产甲烷古菌多样性比较丰富，且可能存在新的分类单元。
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