作者：兰兆吉 吴国江staygreen酵母双杂交系统westem印迹自激活检测
摘要：[目的]揭示SGR基因的作用机理。[方法]构建水稻SGR基因在酵母双杂交体系中的诱饵载体，并对其表达进行鉴定，将目的基因SGR与诱饵质粒载体pGBKT7通过双酶切定向重组构建诱饵质粒pGBKT7-SGR，将pGBKT7-SGR转入酵母菌株Y187中，利用Western印迹法检测其在酵母中的表达，通过缺陷性培养基培养进行自激活检测。[结果]将鉴定正确的重组质粒测序结果与SGR基因比较，序列完全一致，阅读框分析正确。载体pGBKT7-SGR在酵母菌株Y187中可以正确表达出融合蛋白。重组诱饵pGBKT7-SGR质粒对酵母无毒性，其表达产物不能激活酵母菌株Y187的营养缺陷型报告基因。[结论]该重组诱饵质粒可用于酵母双杂交体系，该研究为从cDNA文库筛选水稻诱饵蛋白SGR的互作蛋白奠定了基础。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
