作者：曹访 宋成义 吴晗 谢飞 陈国宏 王杏龙人乳铁蛋白乳清酸蛋白表达载体克隆
摘要：[目的]以小鼠基因组为模板克隆乳清酸蛋白（whey acidic protein gene,WAP）5′和3′调控区,并构建人乳铁蛋白（Human Lactoferrin,hLTF）乳腺特异性表达载体。[方法]以高保真PCR技术扩增WAP5′和WAP3′长度分别为3.5 kb和4.6 kb的DN段,并克隆测序,应用体外连接技术连接pcDNA3.0、WAP5′、WAP3′和hLTF,转化连接产物,以限制性内切酶酶切、PCR验证和琼脂糖电泳鉴定阳性克隆。[结果]内切酶酶切及PCR鉴定结果显示,WAP5′和WAP3′基因克隆成功,其hLTF乳腺特异性表达载体构建正确。[结论]成功克隆WAP5′和WAP3′调控区;成功构建了hLTF乳腺特异性表达载体pW2-hLTF。
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