作者：邱实 蔡云 高兴 顾寿智 刘泽军p53多态定点诱变重叠延伸pcr
摘要：目的：为了研究p53codon72多态的功能,采用定点诱变法构建人p53基因的多态质粒。方法：设计带有突变碱基的引物,通过PCR扩增引入突变碱基,再将突变后的p53序列插入载体中,经测序确定所扩增的DNA序列,并用体外转录翻译系统制备p53蛋白和i ASPP蛋白,免疫沉淀法检测蛋白相互作用。结果：通过PCR获得的含突变碱基的p53序列经连接后插入真核表达载体pReceiver-M01中,构建了p53多态位点为72Arg的表达质粒pReceiver-M01-p53（Arg72）。测序证明序列正确,表达的p53蛋白能与i ASPP相互作用,具有生物学功能。结论：成功构建了p53多态（72Arg）真核表达载体,为进一步深入研究p53多态的生物学功能奠定了基础。
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