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电离辐射诱发的淋巴细胞线粒体DNA多个片段缺失的分析

作者:封江彬 陆雪 陈德清 刘青杰电离辐射淋巴细胞系线粒体dna缺失

摘要:背景与目的:探讨电离辐射是否诱发人淋巴细胞永生化细胞系中mtDNA中多个片段的缺失。材料与方法:用10Gy^60Coγ射线照射指数生长期的人淋巴细胞永生化细胞系,照射后24h、48h提取纯线粒体DNA,用巢式PCR方法进行线粒体DNA 889bp、3895bp和7436bp的缺失分析,并与未照射细胞进行比较;并将纯化的最后一轮PCR产物进行DNA测序和核苷酸同源性分析。结果:用于分析线粒体DNA 3895 bp缺失的并引物对可特异性扩增出线粒体DNA 3895 bp缺失,该扩增产物经纯化、测序证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的nt548-4443之间。用于扩增线粒体DNA 889 bp的引物对可扩增出目的DN段,同时也可扩增出未发生缺失的DN段,扩增产物经纯化、测序,证实线粒体缺失发生在线粒体DNA序列的nt 11688-12576之间。所有未照射细胞无线粒体DNA889bp和3895bp的缺失。而照射前后mt DNA 7436 bp缺失并未增加。结论:电离辐射可诱发淋巴细胞线粒体DNA 889 bp和3895bp的缺失,而对7436 bp缺失影响不大。

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