作者:张岭 侯绍英 吴坤 夏蕾巯基乙酸卵母细胞丝裂原激活蛋白激酶成熟促进因子
摘要:背景与目的:探讨巯基乙酸(TGA)对孕酮诱导爪蟾卵母细胞体外成熟过程中丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)和成熟促进因子(MPF)蛋白激酶活性的影响。材料与方法:用0、5、25和125μg/ml浓度的TGA分别处理经孕酮诱导的体外培养爪蟾卵母细胞,另设不含孕酮的阴性对照组,于处理4h和8h收集卵母细胞进行Western Blotting检测,观察p-Erk1/Erk1蛋白、p-RSK蛋白、Cdc2、p-Cdc2和Cyclin B1蛋白的表达情况。结果:TGA处理爪蟾卵母细胞4h后,Erk1蛋白的磷酸化水平(即MAPK的活性水平),较对照组明显增加(P〈0.05);MAPK的活性底物p-RSK蛋白的表达也增加(P〈0.05);同时伴随着p-Cac2表达水平的下降和Cyclin B1蛋白表达的增强(P〈0.05)。TGA处理8h后Erk1蛋白磷酸化水平和p-RSK蛋白含量与对照组相比无明显差异(P〉0.05),但此时TGA组p-Cac2水平明显增加(P〈0.05),Cyclin B1蛋白的表达降低(P〈0.05)。结论:在孕酮诱导的爪蟾卵母细胞体外成熟早期,TGA可促进MPF和MAPK蛋白激酶及其底物p-RSK的活化;在成熟的晚期,TGA对MAPK活性无明显影响,但明显抑制MPF活性。TGA影响MPF活性的可能机制是降低cyclin B1蛋白水平。
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