作者:安静; 隋建丽; 徐勤枝; 周平坤rna干扰技术辐射敏感性细胞增殖
摘要:背景与目的:建立抑制DNA-PKcs表达的细胞模型,以此探讨DNA-PKcs的功能.材料与方法:构建DNA-PKcs的siRNA抑制表达载体,利用Lipofectamine介导,转染HeLa细胞,筛选稳定表达的转化克隆.Western blot检测DNA-PKcs表达.通过细胞生长速度检测细胞辐射敏感性变化.结果:设计了作用于DNA-PKcs不同位点的3条siRNA,并构建表达质粒,转染HeLa细胞,获得了3个稳定转化克隆,Western blot分析表明其DNA-PKcs表达受到明显抑制,细胞对γ射线和紫外线的敏感性增加,接种裸鼠后的肿瘤生长速度减慢.结论:成功建立了DNA-PKcs表达抑制细胞模型,并且发现DNA-PKcs表达抑制后除影响细胞的辐射敏感性外,还可能与肿瘤细胞增殖有关.
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