作者：熊小芳; 黄天华; 谢庆东; 王晓梅; 陈桂兰乙型肝炎病毒dna复制与表达早期胚胎垂直传递
摘要：背景与目的: 研究乙型肝炎病毒 (Hepatitis B virus,HBV) DNA在早期胚胎中能否复制与表达,探讨 HBV经雄性生殖细胞垂直传递的可能性. 材料与方法: 成熟雄鼠麻醉后双侧睾丸注射经脂质体 DOSPER包裹的 HBV质粒,手术后雄鼠与超排雌鼠合笼交配,用荧光原位杂变 (Fluorescence in situ hybridization,FISH)分别检测单细胞胚和二细胞胚间期核中 HBV DNA的存在与复制,用逆转录聚含酶链反应 (Reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫荧光方法检测 HBV基因在二细胞胚胎中的表达. 结果: 在单细胞胚和二细胞胚间期核内发现 HBV DNA阳性杂交信号, RT-PCR可以扩增出 HBx基因的特异条带,免疫荧光也可见到 HBsAg阳性信号. 结论: HBV DNA进入雄性生殖细胞后,可以整合到宿主基因组内,通过自然受精随精子进入卵母细胞,并在早期胚胎中复制与表达.提示 HBV有可能通过雄性生殖细胞进行垂直传递.
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