作者:欧英杰 冯志强 许银叶凡纳滨对虾牛磺酸半胱氨酸双加氧酶克隆表达
摘要:牛磺酸是一种带有氨基的磺酸,是人体所需营养成分之一。目前,牛磺酸广泛应用于乳制品、饮料、复合味精、豆制品、滋补品、营养液,还可用于水产、动物养殖饲料添加剂,洗涤剂中间体和化学剂等。它也是鱼虾类食品风味形成的呈味氨基酸。半胱氨酸双加氧酶是牛磺酸生物合成的两个限速酶之一,在牛磺酸的合成中起关键作用。本研究利用racePCR技术克隆到了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的半胱氨酸双加氧酶(L.vannamei cysteine dioxygenase,LvCDO)基因的全长序列,对其编码的蛋白的特性进行了分析。同时构建原核表达载体对其进行表达,获得可溶表达的LvCDO,并利用GST琼脂糖凝胶对其进行纯化,获得较纯的重组GST—LvCDO。另外还发现在盐度为15‰的养殖水体中,LvCDO在凡纳滨对虾的血淋巴细胞和肝胰腺细胞中有较高的转录水平,表明其调节渗透压方面具有一定功能。
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