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采用罗氏培养基进行MTB药物敏感性试验的影响因素分析

作者:姜广路; 戴广明; 黄海荣分枝杆菌结核微生物敏感性试验培养基无血清诊断技术和方法结果与过程评价因素分析统计学

摘要:目的评价基于罗氏培养基绝对浓度法的结核分枝杆菌药物敏感性试验(简称“药敏试验”)检测异烟肼、利福平、乙胺丁醇的药物浓度标准,以及不同接种菌量、接种方式对耐药性检测结果的影响。方法按照世界卫生组织推荐方法从可能敏感患者和可能耐药患者痰液样本中的分离菌株,分别测定两类菌株对异烟肼、利福平、乙胺丁醇的最低抑菌浓度(MIC)并计算累计百分比,以两类菌株累计百分比差值最大的MIC确定耐药界限;分别将菌量为10^-3mg和10^-4mg的结核分枝杆菌,接种于比例法耐药界限的3种药物含药培养基,经4周孵育后比较耐药结果;比较接种量均为10^6mg菌量的两种接种方法(接种环和滴管接种)孵育4周后菌落形成单位(CFU)的数量差异。结果异烟肼、利福平和乙胺丁醇经绝对浓度法测定的浓度界限分别为0.2μg/ml、40μg/ml、2μg/ml不同接种量(10^-3mg与10^-4mg)接种相同含药培养基,其药敏试验结果差异无统计学意义(矿值分别为0.57、0.00、0.00,P值分别为0.45、1.00、1.00);使用接种环接种菌悬液的菌落形成单位数[(40.60±34.54)个,95%CI=35.08-46.12个]明显多于使用滴管的菌落形成单位数[(11.27±11.11)个,95%CI=9.50-13.05个](t=11.58,P〈0.01)。结论异烟肼、利福平、乙胺丁醇的耐药界限采用比例法药物浓度界限更适宜;接种菌量10^-3g和10^-4mg对药敏试验结果无明显影响;接种环接种效果较滴管接种效果好。

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