作者：官丽莉; 崔琪; 韩雨彤; 武云云; 胡人阁; ...红花生育酚环化酶克隆表达分析
摘要：生育酚环化酶（tocopherol cyclase,TC）是植物Vit E生物合成途径的关键酶之一。该研究根据红花转录组数据,利用RT-PCR（reverse transcription-PCR）方法从药用植物红花种子中克隆得到生育酚环化酶基因序列,命名为Ct TC,对其进行生物信息学分析,结果表明该基因开放阅读框（ORF）为1 524 bp,编码507个氨基酸,相对分子质量为62.9 k Da,等电点（theoretical p I）为5.01。跨膜结构分析表明TC存在跨膜结构。蛋白糖基化位点分析表明TC蛋白含有1个丝氨酸糖基化位点以及1个苏氨酸糖基化位点。亚细胞定位表明其定位于叶绿体中。利用荧光定量PCR检测红花不同发育时期种子以及干旱胁迫不同时间的红花叶片中TC基因的表达量,结果表明TC基因在红花的开花后50 d的种子中表达量最高,干旱胁迫6 d时TC基因的表达量达到最高值,随后下降,为TC基因在红花Vit E合成以及抵抗逆境胁迫中的功能研究奠定基础。
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