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DC-CIK与CIK体外培养对包含HBV基因的HepAD38细胞的杀伤效果研究

作者:龚觅; 舒丹dccikhepad38效果

摘要:目的:研究乙型肝炎病毒抗原致敏的树突状细胞(DC)和CIK细胞共同培养后对Hep AD38细胞(含整合HBV基因组)的杀伤作用。方法:从乙肝患者外周血中提取外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),平均分为两组,研究组培养DC,培养DC第5天加入乙肝抗原并收获DC,然后加入CIK细胞,培养出DC-CIK细胞;对照组单独培养CIK细胞。两组在培养15 d后分别收获DC-CIK细胞与CIK细胞,同时作为效应细胞,把含有乙肝病毒的Hep AD38细胞作为靶细胞,分别在5∶1、10∶1的效靶比时进行杀伤试验,使用LDH释放法测定杀伤活性,并用荧光扩增法检测杀伤试验后培养基内HBV-DNA水平。结果:研究组的DC-CIK细胞的5∶1效靶比时的平均杀伤率为(54.4±6.3)%、10∶1效靶比时的平均杀伤率为(71.5±4.5)%,均明显高于对照组CIK细胞的(42.4±3.0)%、(59.4±4.5)%,差异均有统计学意义(P〈0.05)。研究组的DC-CIK细胞5∶1效靶比时的培养基内的HBV-DNA平均为(1.20±0.30)×10^6/m L、10:1效靶比时的培养基内的HBV-DNA平均为(1.64±0.60)×10^7/m L,均明显高于对照组CIK细胞的(0.90±0.23)×10^6/m L、(1.28±0.23)×10^7/m L,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论:CIK细胞与DC-CIK细胞对Hep AD38细胞均具有杀伤效果,而且随着效靶比的升高,杀伤效果增强。同时,乙肝抗原致敏的DC诱导出的特异性CIK细胞(DC-CIK细胞),能够有效提高CIK细胞对乙肝病毒感染的Hep AD38细胞的杀伤作用,其杀伤作用可能与DC被乙肝抗原致敏后诱导出特异性CIK,增强各自疗效有关。

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