作者：朱文赫; 徐俊杰; 张巍; 李妍; 张红; 吕士...西兰花多肽细胞凋亡氧化损伤心血管疾病
摘要：目的探索西兰花多肽组分对过氧化氢（H2O2）所致血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法采用醇沉,Sephadex G-25凝胶过滤层析获得分离西兰花多肽组分。体外培养人静脉血管内皮细胞EVC-304,经不同浓度西兰花多肽组分Ⅱ（1、2、4、8μg·mL-1）处理细胞24 h后,加入100μmol·L-1 H2O2再进行培养12 h。四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞存活率,细胞分析仪检测EVC-304细胞凋亡和线粒体膜电位的变化,试剂盒法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,Western blot法检测细胞内激活型Caspase-3、细胞色素C（Cyto C）、Bax和Bcl-2蛋白表达变化。结果 Sephadex G-25凝胶过滤层析共获得4个洗脱峰,选择西兰花多肽组分Ⅱ用于后续实验。实验结果表明,同正常组相比,H2O2损伤组细胞存活率显著降低（P〈0.01）,细胞凋亡率显著升高（P〈0.01）,线粒体膜电位去极化细胞比例升高（P〈0.01）,MDA含量增加,SOD活性减少,激活型Caspase-3、细胞质中Cyto C表达水平,Bax/Bcl-2比值升高（P〈0.01）。与H2O2损伤组相比,2、4、8μg·mL-1西兰花多肽组分Ⅱ处理组细胞存活率明显升高（P〈0.01）,凋亡细胞率明显下降（P〈0.01）,线粒体膜电位去极化细胞比例下降（P〈0.01）,MDA含量下降,SOD活性升高,细胞内激活型Caspase-3,Cyto C表达,Bax/Bcl-2比值下降（P〈0.01）。结论西兰花多肽组分Ⅱ对H2O2所致血管内皮细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与保护血管内皮细胞受损线粒体功能相关。
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