作者：李丹丹; 汤响林; 龙隆; 许龙龙; 谭洪玲; ...何首乌肝毒性细胞hepg2高内涵筛选技术氧化应激内质网应激
摘要：目的应用高内涵筛选技术研究生首乌醇提物（RPM）和制首乌醇提物（RPMP）的肝毒性及其可能机制。方法 RPM（终浓度10,25,50,100,200和300 mg·L-1）和RPMP（终浓度10,50,100,300,600和1200 mg·L-1）作用于Hep G2细胞324 h。采用Cell Titer-GloTM荧光细胞活性检测试剂盒检测Hep G2细胞存活率;应用高内涵筛选技术进行Hep G2细胞计数,并检测线粒体内活性氧（ROS）、线粒体膜电位（MMP）、细胞内谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶2（SOD2）、转录激活因子4（ATF4）水平及细胞凋亡和细胞周期阻滞;Western蛋白质印迹法验证Hep G2细胞SOD2和ATF4蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比,RPM 300 mg·L-1作用24 h使Hep G2细胞存活率下降约48%（P〈0.01）,而相同浓度RPMP对细胞存活率无显著影响;RPM和RPMP均能降低MMP（P〈0.05）,并升高GSH,ROS,SOD2和ATF4水平（P〈0.05）。与细胞对照组相比,RPM 200 mg·L-1作用3 h SOD2水平显著升高（P〈0.05）,6 h ATF4水平显著升高（P〈0.05）;RPMP 300 mg·L-1作用6 h ATF4水平显著升高（P〈0.05）,24 h SOD2水平显著升高（P〈0.05）。结论 RPM和RPMP均具有一定的细胞毒性,RPM的细胞毒性强于RPMP,两者的肝毒性可能主要与氧化应激和内质网应激导致的细胞凋亡有关。
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