作者:范晴; 谢芝勋; 谢志勤; 庞耀珊; 邓显文; ...口蹄疫病毒水泡性口炎病毒酶切
摘要:LAMP技术是一种快速新型的核酸检测技术,该技术利用4条引物在恒温下扩增目的DNA,特异性好敏感性高。本试验旨在建立一种能同时鉴别诊断FMDV和VsV的二重RT—LAMP检测方法。根据口蹄疫病毒(FMDV)3D基因和水泡性口炎病毒(VSV)N基因的保守序列。设计了2套特异性引物,在每套引物的内引物中插入酶切位置EcoRI,对反应条件进行了优化,建立了恒温快速的检测方法。结果显示:该方法特异性好,能检测到口蹄疫病毒的A,O,Asial亚型和水泡性口炎的NJ和IND亚型,并与其他对照牛病原体不发生交叉反应;敏感性高,最低能够检测个100个FMDV病毒RNA和100个VSV病毒RNA;干扰性小,能同时检测两个模板的不同浓度组合。本试验建立的口蹄疫和水泡性口炎二重RT-LAMP方法具有简便、快速、特异、敏感等优点,可用于FMDV和VSv的临床检测和流行病学调查。
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