作者:袁霏; 王康; 郭道磊; 马文杰; 褚颖; 郭慧...禽网状内皮组织增生症病毒gp90囊膜蛋白cpgodn核酸缓释佐剂免疫保护
摘要:主要探讨禽网状内皮组织增生症病毒(REV)亚单位疫苗联合CpG-ODN/Poly(I:C)缓释佐剂对雏鸡的免疫保护作用。根据已发表的REV囊膜蛋白G;p90的基因序列,设计引物,从感染REV的细胞中扩增出目的基因,构建原核重组表达栽体,在Rosseta(E.coli)菌中诱导表达,对表达蛋白进行纯化和Westernblot鉴定;制备的重组蛋白与CpG-ODN/Poly(I:C)缓释佐剂联合接种7日龄雏鸡,2次加强免疫后第2周进行REV攻毒,接种后每周检测血清抗体和攻毒后检测REV病毒血症,评价免疫保护效果。结果显示,成功构建重组原核表达质粒,并获得相对分子质量为51000的重组表达产物,该产物能够与REV单克隆抗体特异性结合;与CpG-ODN/PoIy(I:C)缓释佐剂联合接种后能够诱导雏鸡产生较单一免疫Gp90蛋白抗体效价显著增加的血清抗体,经二次加强免疫全部鸡只产生抗体;攻毒后接种雏鸡病毒血症为0%(0/13),而对照组和单一免疫Gp90蛋白组分别为69%(9/13)和15%(2/13)。结果表明,本研究制备的REVGp90重组蛋白联合CpG-ODN/Poly(I:C)缓释佐剂对雏鸡具有完全的保护力,这为开展REV疫苗防控提供科学数据。
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