作者：王娟; 郜玉娇; 孙超; 赵欣古紫质4单点突变光循环中间态质子泵天冬氨酸97
摘要：古紫质4（archaerhodopsin 4,aR4）是新近发现的古生菌Halobacterium species xz515红膜上唯一的光敏视黄醛蛋白,具有和细菌视紫红质（Bacteriorhodopsin,bR）相似的质子泵功能,但在中性pH条件下,其质子释放和摄取顺序与bR相反。针对质子供体天冬氨酸97（Aspartic acid 97,D97）对aR4光循环;特别是对质子释放摄取顺序和菌株ATP生成率的影响,采用基因定点突变技术,构建了aR4的单突变体D97N,以及相对应的bR单突变体D96N。采用紫外-可见吸收光谱和闪光动力学光谱技术初步研究突变对视黄醛键合区、光反应中间态M态和O态、质子泵功能以及菌株ATP生成率的影响。结果表明,D97N突变对视黄醛紫外-可见光吸收波长没有太大影响,但造成M态衰减时间的显著延长、质子泵功能的消失及菌株ATP的生成率大幅降低。与bR中的D96作用相比,D97对aR4质子功能的影响有所不同,这可能与D97所处的一个更为疏水性的胞外侧环境有关。
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