作者:胡青青; 赵肃清; 贺攀; 焦洛莹须癣毛癣菌细胞壁蛋白卵黄抗体
摘要:目的:提取须癣毛癣菌的细胞壁蛋白作为免疫原制备特异性卵黄抗体,并鉴定其生物活性,为卵黄抗体在预防与治疗皮肤癣疾病的应用奠定基础。方法:本研究采用冷碱抽提的方法提取须癣毛癣菌的细胞壁蛋白,并用其免疫健康的产蛋母鸡。采用聚乙二醇两步沉淀法及饱和硫酸铵盐析提纯卵黄抗体;用Bradford法检测卵黄抗体中蛋白含量;SDS-PAGE凝胶电泳分析测定卵黄抗体的纯度以及相对分子质量;ELISA检测纯化的卵黄抗体的效价;Western blot分析特异性卵黄抗体的免疫反应性。结果:提取的卵黄抗体中蛋白纯度达到87.27%。由细胞壁蛋白制备的特异性卵黄抗体在初免20 d后效价开始升高,到45天达到最高值(1∶32 000)。Western blot结果显示由细胞壁蛋白制备的卵黄抗体能与其良好的特异性结合,具有较好的免疫反应性。结论:本实验提取的须癣毛癣菌细胞壁蛋白作为免疫原可以制备出特异性较强的卵黄抗体,为须癣毛癣菌感染的皮肤疾病提供了治疗新思路。
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