作者:庄远红基因芯片外标对照polya的质粒载体基因芯片技术制备应用标的中外大肠杆菌rna
摘要:目的把与慕因芯片上的蒜因没有同源性的核酸片段制备成含有PolyA的RNA,在基因芯片技术中用做芯片的外标(external RNA)。方法通过序列比对从大肠杆菌的摹因间序列上找到与GenBank中所有序列都没有重大同源性的8个核酸片段,把此8个核酸片段克隆到含有PolyA的质粒载体中,然后可以通过体外转录的方法制备出每段序列对应的PolyA—RNA。在基因芯片上,放置有这8个大肠杆菌的PCR产物,同时在待检测的物种RNA中.掺入此8个大肠杆菌片段对应的PolyA—RNA。结果这种外标PolyA—RNA掺入的方法.可以追踪基因芯片技术过程中可能出现问题的操作环节.此方法不依赖于待分析物种RNA的性质,是基因芯片技术中一种观察芯片结果定量和定性很必要的质控对照。
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