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内参照基因在实时荧光定量RT-PCR检测中的应用

作者:陈瑾歆 陈建业 李云祥内参照基因

摘要:目的建立测定内参照β-actin表达量的实时荧光定量RT-PCR两步法检测方法。方法根据Genbank中人β-actin保守区域序列设计荧光PCR适用的引物和探针,构建质粒标准品建立标准曲线用于荧光PCR相对定量,检测荧光PCR方法的特异性和重复性。结果建立了人β-actin实时荧光RT-PCR检测方法。结论本实验建立的人β-actin表达实时荧光RT-PCR两步法检测方法特异性和重复性较好,为β-actin作为定量RT-PCR中内参照基因进行人其他功能基因和病原基因表达的定量分析奠定了基础。

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